الایزا

الایزا Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)یک روش رایج آزمایشگاهی است که برای سنجش یک آنالیت (معمولا آنتی‌بادی یا آنتی‌ژن) در محلول به کار می‌رود. این روش یک روش ایمونولوژیک، کمی و بسیار حساس است که در آن از آنتی‌بادی استفاده می‌شود. به طور کلی مراحل الایزا به این صورت است که ابتدا نمونه مورد نظر در چاهک پلیت ها ریخته می‌شود. در مرحله بعد آنتی‌بادی نشاندار شده با آنزیم (معمولا HRP) اضافه می‌شود. سپس سوبسترای مناسب آنزیم (به طور مثال TMB) اضافه می‌شود که توسط آنزیم متصل به آنتی‌بادی به رنگ قابل شناسایی تبدیل می‌شود. با اضافه کردن محلول Stop واکنش متوقف و سپس با استفاده از دستگاه Elisa reader جذب نوری نمونه خوانش می‌شود. در هریک از مراحل کار قبل از اضافه کردن محلول جدید، چاهک‌های پلیت با استفاده از محلول Wash شستشو داده می‌شوند تا اجزای متصل نشده از چاهک حذف شوند.

• الایزای رقابتی
• الایزای غیر رقابتی

الایزای غیر رقابتی خود به سه دسته الایزای مستقیم، الایزای غیرمستقیم و ساندویچ الایزا تقسیم می‌شود. در الایزای مستقیم از آنتی‌بادی اولیه نشاندار شده استفاده می‌شود که به طور مستقیم با آنتی‌ژن واکنش می‌دهد. در الایزای غیرمستقیم از آنتی‌بادی اولیه غیر نشاندار شده و آنتی‌بادی ثانویه نشاندار شده استفاده می‌شود. آنتی‌بادی ثانویه برای آنتی‌بادی اولیه اختصاصیت دارد. در ساندویچ الایزا آنتی‌ژن‌هایی همچون تومور مارکرها، هورمون‌ها و پروتئین‌های سرم ردیابی می‌شوند. در این روش آنتی‌ژن موجود در نمونه توسط آنتی‌بادی کد شده در چاهک به دام میافتد. در مرحله بعد آنتی‌بادی نشاندار شده با آنزیم به آنتی‌ژن متصل می‌شود و به این ترتیب ساندویچ Ab-Ag-Ab شکل می‌گیرد. در الایزای رقابتی، آنتی‌بادی در کف چاهک کد شده است. آنتی‌ژن موجود در سرم و آنتی‌ژن نشادار شده با آنزیم همزمان به چاهک اضافه می‌شوند. در این نوع الایزا میزان تشکیل کمپلکس آنتی‌بادی-آنتی‌ژن نشاندار شده با آنزیم با میزان آنتی‌ژن موجود در نمونه رابطه عکس دارد. هر چقدر میزان آنتی‌ژن موجود در نمونه بیشتر باشد، میزان کمتری از کمپلکس آنتی‌بادی-آنتی‌ژن نشاندار شده با آنزیم تشکیل می‌شود و در نتیجه فعالیت آنزیمی کمتر و رنگ کمتری صورت می‌گیرد. این نوع الایزا برای ردیابی مولکول‌های کوچک مثل T3، T4 و پروژسترون به کار می‌رود.

خدمات قابل ارائه:

• سنجش سایتوکاینهای مختلف سیستم ایمنی در سوپرتانانت کشت سلولی و سرم و پلاسما
• سنجش مارکرهای استرس اکسیداتیو در سوپرتانانت کشت سلولی و سرم و پلاسما
• سنجش هورمونها در سوپرتانانت کشت سلولی و سرم و پلاسما